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皮肤性病学/实验室检查

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皮肤组织病理检查[编辑]

当临床诊断有困难时,组织病理检查常有助于诊断和分型。

皮损的选择[编辑]

  • 通常选择成熟而未经治疗的典型损害,同时带一部分损害周围的正常皮肤,以便与病变组织作对比。
  • 水疱、脓疱或需寻找病原体的损害,应切取早期损害,水疱或脓疱应完整切取。
  • 如系较大的损害,应取其活动性的边缘。如同时存在几种皮肤病的损害时,应分别取其皮损做检查。

取材方法[编辑]

有外科手术法及钻孔法两种。

外科手术法[编辑]

 常规消毒皮肤和局部麻醉后,按无菌操作法,用手术刀沿皮纹方向做长1cm、宽0.3~0.5cm的梭形切口,刀锋沿皮面垂直,切取标本应深达皮下组织,底部与表面宽度一致。切忌用钳夹取组织,以免造成人为的组织变化,切取的标本应平放在吸水纸上,以防标本卷曲,或立即放入盛有10%甲醛液或95%乙醇的小瓶中固定。待送病理检查。

钻孔法[编辑]

 用于皮损较小无须刀切或刀切困难者。消毒局麻后,以左手固定并绷紧局部皮肤,右手持皮肤组织钻孔器钻孔,达到一定深度后,用有齿镊小心提起组织,取小弯剪从其根部剪下,即可固定送检。压迫创口止血,涂布少许碘仿,加压包扎。颜面部用此法时,应缝合创口。

真菌检查[编辑]

真菌检查对皮肤真菌病的诊断具有重要意义。常用的有直接镜检和真菌培养。

标本的采集[编辑]

 浅部真菌病常采取鳞屑、菌痂、毛发和甲屑等标本。取材时应选择未治疗和病灶边缘的新损害。病甲应先刮除甲板表层及游离缘的病变组织,然后取其深层的甲屑。深部真菌病,根据病情采取脓液、痰、尿、粪、口腔、阴道分泌物以及各种穿刺液和病变组织等,应以无菌操作方法采取标本。

直接镜检[编辑]

 将采取的标本置于载玻片上,通常滴上1~2滴10%~20%氢氧化钾溶液以溶解角质,盖上盖玻片,放置数分钟或在火焰上微加温以加速角质溶解,然后轻轻压紧盖玻片,驱除空气泡,吸去周围溢液,以免沾污盖玻片而妨碍镜检。有些标本(如脑脊液检查隐球菌)需滴1滴印度墨水使之混匀后加盖玻片后镜检。某些深部真菌病须用革兰、瑞特或姬姆萨等染色后镜检。如一次检查为阴性,应重复检查,必要时做真菌培养。

真菌培养[编辑]

 主要用于确定菌种,也可用作辅助直接镜检的检查结果。常用的培养方法有常规培养、大培养和微量培养3种。常规培养一般用试管培养,在无菌条件下将标本接种于沙煲培养基斜面上。一般每一斜面接种2~3处,每份病材接种2~3管。浅部真菌,在25℃室温下培养,一般1周左右即开始生长,观察2~3周;深部真菌,在37℃下培养,观察3~4周。

滤过紫外线检查[编辑]

滤过紫外线检查(Wood灯检查)即通过含氧化镍的石英玻璃过滤后所获得的长波紫外线,照射某些皮肤病的皮损或其他排泄物。根据其是否出现荧光或出现何种颜色的荧光,对某些皮肤病的诊断和鉴别诊断提供依据。如白癣的病发呈亮绿色荧光,黄癣呈暗绿色荧光,黑点癣无荧光,红癣呈珊瑚红色荧光,鳞癣呈亮红色荧光,基底细胞癌则无荧光。

疥螨检查[编辑]

针挑法[编辑]

 首先用蓝墨水滴于皮损处寻找隧道。选用6号注射针头,在隧道末端虫点处,距离虫点底部1mm,垂直于隧道长轴进针,直至虫点底部,并绕过虫体,然后放平针杆(5°~10°),稍加转动,疥虫即落入针口孔槽内,缓慢挑破皮肤出针,虫点多在水疱的边缘。

刮片法[编辑]

 主要对丘疹内疥螨进行检查,用消毒外科刀片蘸少许矿物油寻找新发的炎性丘疹,平刮以刮取丘疹顶部的角质部分,至油滴内有细小血点为止。连刮6~7个丘疹后,移至载玻片上,镜下可见幼虫、虫卵及虫粪。

细胞学诊断[编辑]

适用于疱疹性、病毒性皮肤病和基底细胞癌皮损。在显微镜下,这些损害的细胞涂片检查,可较快地获得比较正确的诊断。方法简单,较易掌握。外周血检测红斑狼疮细胞或Sézary细胞,对明确诊断也有帮助。

梅毒螺旋体检查[编辑]

梅毒螺旋体暗视野显微镜检查[编辑]

 检查者戴手套,无菌生理盐水棉拭子拭去皮损(硬下疳、溃疡、扁平湿疣及湿丘疹等)表面污物,或用消毒钝刀轻轻除去痂皮,轻刮皮损表面并轻施压力至出现渗液而无出血为度。用盖玻片蘸取少量渗出液,覆盖于有生理盐水的载玻片上,盖上盖玻片,置于暗视野显微镜下,见长5~20μm、有6~12个螺旋、运动活泼的螺旋体即为阳性。

螺旋体镀银染色法[编辑]

 螺旋体具有亲银性,硝酸银可使之染呈棕黑色。方法:取材、涂片,空气中自然干燥,用罗氏固定液固定1~2min,无水乙醇洗涤。滴媒染液2~3滴,酒精灯微加热至产生热蒸汽为止,染30s,水洗,最后滴加银染液,并加热产生蒸汽,染30s,水洗,自然干燥,置油镜下检查。阳性结果为淡棕色背景下,见染成棕黑色的螺旋体。

螺旋体免疫荧光染色法[编辑]

直接法[编辑]

将受检标本均匀涂布于载玻片上,自然干燥后用丙酮固定10min。另外,用可培养的非致病性螺旋体培养物进行吸收的抗人(兔)梅毒螺旋体血清与FITC结合,并以适当稀释的此血清涂于备有标本的载玻片上,37℃孵育30min。彻底清洗,缓冲甘油封固,荧光显微镜镜检。

间接法[编辑]

标本制作及固定同直接法。加经吸收的抗血清,37℃孵育30min,彻底冲洗;加FITC结合的抗人(兔)Ig,孵育30min,彻底冲洗;缓冲甘油封固,待检。发现呈亮绿色荧光的梅毒螺旋体为阳性,可确诊梅毒。

淋球菌检查[编辑]

直接涂片检查[编辑]

 取脓性分泌物涂片、干燥、固定、革兰染色,可见革兰阴性细胞内双球菌。女性患者须取宫颈分泌物做培养。

培养[编辑]

 取男性尿道口以上2.0~4.0cm及女性宫颈2.0~4.0cm处分泌物,直接接种于T-M、NYG培养基培养,24~48h挑取菌落做革兰染色、氧化酶试验及糖发酵试验等鉴定,并做药敏试验测最小抑菌浓度以及β-内酰胺酶检测。